Verschil tussen endonuclease en exonuclease | Endonuclease vs Exonuclease

Hoofdverschil - Endonuclease vs Exonuclease

Alvorens te kijken naar het verschil tussen endonuclease en exonuclease, is het belangrijk om te weten wat precies een nuclease is. Een nuclease is een enzym dat in staat is om fosfodiesterbindingen tussen nucleotiden in nucleïnezuren te splitsen. Endonuclease en exonuclease zijn twee classificaties van nucleasen. Het belangrijkste verschil tussen endonuclease en exonuclease is dat endonucleasen de bindingen splitsen tussen nucleotiden binnen het nucleïnezuurmolecuul terwijl exonucleasen de binding tussen nucleotiden splitsen bij de 3'- of 5'-uiteinden van het nucleïnezuurmolecuul.

INHOUD

1. Overzicht en sleutelverschil

2. Wat is een nuclease

3. Wat is een Endonuclease

4. Wat is een Exonuclease

5. Side-by-side Vergelijking - Endonuclease vs Exonuclease

6. Samenvatting

Wat is een nuclease?

Een nuclease is een enzym dat de mogelijkheid heeft om fosfodiesterbindingen tussen nucleotiden in nucleïnezuren te splitsen. Het behoort tot de hydrolase-enzymgroep, aangezien het de chemische bindingen tussen nucleotiden hydrolyseert. Dit enzym is essentieel voor natuurlijke DNA-herstelmechanismen die zich voordoen in de cellen en in biotechnologische processen zoals genkloning, recombinante DNA-technologie, RFLP, AFLP, gensequentiebepaling, gentherapie, genoom mapping etc.

Er zijn twee belangrijke soorten nucleasen: ribonuclease en deoxyribonuclease, die respectievelijk de chemische bindingen tussen monomeren van RNA en DNA handelen en breken. Volgens de actieplaats van de nucleasen worden ze verder verdeeld in twee groepen, namelijk endonuclease en exonuclease. Endonucleasen herkennen specifieke sequentie gebieden van de nucleïnezuren en kloof de fosfodiesterbindingen tussen nucleotiden die zich in het midden van de nucleïnezuren bevinden. Exonucleasen splitsen fosfodiesterbindingen tussen nucleotiden die zich bevinden aan de uiteinden van de nucleïnezuren.

Figuur 1: Nuclease Activiteit

Wat is een Endonuclease?

Endonuclease is een type nucleasen die nucleïnezuren uit het midden splitsen. Het herkent specifieke nucleotide sequenties van nucleïnezuur en breekt de chemische bindingen tussen nucleotiden. Zij staan ook bekend als restrictie-endonucleasen omdat ze specifieke restrictieplaatsen zoeken en de binding splitsen en restrictiefragmenten produceren. Meer dan 100 restrictie-endonucleasen worden geïdentificeerd in bacteriën en archea en worden verkregen voor commerciële doeleinden.

Beperkende endonucleasen worden uitgebreid gebruikt in biotechnologie. Ze spelen een vitale rol in moleculaire kloning. De meesten van hen zijn dimere enzymen samengesteld uit twee eiwit subeenheden. Twee eiwit subunits wikkelen het dubbelstrengige DNA en splitsen beide strengen van beide zijden afzonderlijk. Er zijn honderden soorten restrictie-endonucleasen met unieke herkenningsplaatsen in bacteriën. Door hun hoge specificiteit in beperking kloven ze alleen bij specifieke sequenties. Daarom worden ze beschouwd als zeer nuttige moleculaire instrumenten in recombinant DNA technologie. Zonder restrictie-endonucleasen is de productie van recombinant DNA-molecuul niet mogelijk. Het creëren van het recombinante DNA-molecuul is de basisstap van de meeste moleculaire biologische technologieën.

Om de unieke sequentieherkenning door restrictie-endonucleasen te begrijpen, zal het volgende voorbeeld de lezers helpen.

Bam HI is een restrictie-endonuclease dat de volgende restrictieplaats in het DNA-molecuul zoekt (de site is in rode letters weergegeven).

Zodra Bam HI het nucleïnezuur van de restrictieplaats splitst, produceert het de volgende twee fragmenten.

EcoRI is een ander restrictie-endonuclease, zeer nuttig in recombinante DNA-technologie, werkt op zijn specifieke restrictie herkenningsplaats en splitst DNA zoals getoond in figuur 2.

Figuur 2: EcoRI

Wat is een Exonuclease?

Exonuclease is een nuclease-enzym dat chemische bindingen splitst tussen nucleotiden bij de 3'- of 5'-uiteinden van de nucleïnezuurketens. Het breekt enkele nucleotiden aan het einde van de keten en produceert nucleosiden door fosfaatgroepen over te brengen naar water. Exonucleasen worden gevonden in archea, bacteriën en eukaryoten. In E coli zijn er 17 verschillende exonucleasen aanwezig, waaronder DNA-polymeren 1, 2 en 3. Verscheidene DNA-polymerasen vertoonden 3 'tot 5' exonuclease-proofreading-activiteit.

Exonucleasen zijn belangrijk bij het repareren van DNA, genetische recombinatie, preventie van het optreden van mutaties, genoomstabilisatie, enz.

Figuur 3: Exonuclease-werking van RecBCD van E Coli

Wat is het verschil tussen Endonuclease en Exonuclease?

- diff Artikel Midden voor Tabel ->

Endonuclease vs Exonuclease
Endonuclease is een type nuclease enzymen die de bindingen tussen nucleotiden splitsen binnen het nucleïnezuurmolecuul.	Exonuclease is een type nuclease enzymen die de binding tussen nucleotiden splitsen bij de 3'- of 5'-uiteinden van het nucleïnezuurmolecuul.
Eindproducten
Endonucleasen produceren oligonucleotide restrictiefragmenten	Exonucleotiden produceren nucleosiden
Functie
Ze breken fosfodiesterbindingen en produceren restrictiefragmenten. Maar hun punt verwijdert nucleotiden één voor één.	Ze verwijderen nucleotiden één voor één uit de uiteinden van de nucleïnezuren. Voorbeelden omvatten Bam HI, EcoRI, Hind III, Hpa I, Sma I,
Voorbeelden omvatten Exonuclease I, Exonuclease III, RecBCD (Exonuclease V), RecJ exonuclease, Exonuclease VIII / RecE, Exonuclease IX, Exonuclease T, Exonuclease X etc.
Samenvatting - Endonuclease vs Exonuclease	Nucleases zijn verantwoordelijk voor het breken van fosfodiester chemische bindingen tussen nucleotiden van de nucleïnezuren. Nucleases kunnen optreden binnen of aan de uiteinden van de nucleïnezuurketen. Volgens de site van de actie komen twee hoofdsoorten nucleasen in organismen voor. Zij zijn endonuclease en exonuclease. Endonucleasen splitsen nucleotiden uit het midden van de keten, terwijl exonucleasen nucleotiden splitsen van de uiteinden van de nucleïnezuurketen. Endonucleasen zijn zeer belangrijk in recombinante DNA-technologie, aangezien zij specifieke basissequenties in de nucleïnezuurketen herkennen en bindingen binden tussen nucleotiden.

Referentie:

2. Pingoud, Alfred, en Albert Jeltsch. "Structuur en functie van type II-restrictie-endonucleasen. "Nucleïnezuren Onderzoek. Oxford University Press, 15 september 2001. Web. 11 maart 2017

3. Lovett, Susan T. "De DNA exonucleases van Escherichia coli. "EcoSal Plus. U. S. National Library of Medicine, december 2011. Web. 11 maart 2017

Image Courtesy:

1. "Restriction enzyme Eco RI" Door Tinastella - Eigen werk (Openbaar domein) via Commons Wikimedia

2. "HR RecBCD RecA" Door Emw2012 - Eigen werk (CC BY-SA 3. 0) via Commons Wikimedia