Transformatie vs transfectie | Verschil tussen Transformatie en Transfectie

Anonim

Transformatie vs Transfectie

Transformatie en transfectie zijn twee eenvoudige technieken die gebruikt worden om een ​​vreemd gen in een gastheercel in te voeren. Deze technieken zijn echter afhankelijk van het type gastheer of vector systemen.

Wat is Cell Transformation?

Transformatie is de techniek die gebruikt wordt om genen in gist- en bacteriële cellen te introduceren. Deze techniek veroorzaakt gewoonlijk erfelijke veranderingen in genen, en dus is de expressie van het gen permanent. De bacteriële transformatie werd in 1928 voor het eerst geïntroduceerd door Frederick Griffith. In de vroege jaren zeventig werd deze techniek gebruikt in

E. coli. Tijdens het proces van transformatie van E. coli worden de cellen geweekt in ijskoude oplossing van CaCl 2 . Deze stap maakt E. coli cellen die bevoegd zijn. Daarna worden de bevoegde cellen gemengd met het plasmide-DNA en gedurende 20-30 minuten op ijs geïncubeerd. Dan wordt er een korte hitte schok gegeven om de overdracht van DNA in de cel mogelijk te maken. Tenslotte worden de cellen in een voedingsbodem geplaatst en gedurende 60-90 minuten bij 37 ° C geïncubeerd om de plasmiden te bepalen. Zodra deze stappen succesvol zijn voltooid, kunnen de getransformeerde cellen op een geschikt medium geplaatst worden voor de voortplanting van cellen. Omdat transformatie als een inefficiënte techniek wordt beschouwd, mag het niet worden gebruikt voor de voorbereiding van kloonbanken.

Wat is celtransfectie?

Transfectie is een methode van introductie van een vreemd gen, meestal in zoogdiercellen. Er zijn twee transfectiemethoden; namelijk transient transfectie en stabiele transfectie. Bij transiënte transfectie is genuitdrukking voor een beperkte tijd beschikbaar; Zo veroorzaakt de verandering van gen tijdelijke expressie. Deze transfectie methode is eenvoudig en snel; daarom kan het routinematig worden gebruikt. Een nadeel van transiënte transfectie is de moeilijkheid om te appliceren voor grootschalige eiwitsynthesestelsels.

Tijdens stabiele transfectie wordt een doelgen geïntegreerd in het genoom van de gastheercel, en dus is de genuitdrukking permanent, in tegenstelling tot de transiënte transfectie.

Wat is het verschil tussen Transformatie en Transfectie?

• Transformatie is de introductie van een gen in een prokaryotische cel (bacterie en gist), terwijl transfectie gewoonlijk de introductie van een gen in een zoogdiercel wordt genoemd.

• Transformatie leidt tot erfelijke verandering, in genen, terwijl transfectie kan resulteren in tijdelijke expressie of permanente veranderingen in genen.