Verschil tussen SDS-PAGE en gelelektroforese Verschil tussen

Anonim

SDS-pagina versus gelelektroforese

Elektroforese kan worden gebruikt om de massa van een voorwerp te bepalen, meestal voor proteïne en deoxyribonucleïnezuur (DNA). Het DNA-onderdeel kan, wanneer het wordt geïntroduceerd in chemicaliën, het informatieproces versnellen of vertragen. DNA-markers van bekende massa worden gebruikt om de afmeting van de objecten die reizen na het einde van de elektroforese te benaderen. Elektroforese is waarschijnlijk de meest gebruikte tool voor moleculair biologen en biochemici.

Er zijn twee soorten elektroforese die vaak in dit proces worden gebruikt. Dit zijn natriumdodecylsulfaatpolyacrylamidegelelektroforese (SDS-PAGE) en natieve gelelektroforese.

SDS-PAGE is een niet-selectieve methode voor gelelektroforese die wordt gebruikt op gebieden zoals: biochemie, forensische wetenschap, biologie en genetica om eiwitten los te maken van hun elektroforetische mobiliteit. SDS is een anionische oppervlakteactieve stof die kan worden gebruikt om te helpen bij het lyseren van cellen tijdens DNA-extractie en voor het scheiden van eiwitten in SDS-PAGE. Tijdens elektroforese wordt een mengsel van eiwitten eerst vloeibaar gemaakt in een oplossing van SDS. Vervolgens wordt een stof genaamd Mercaptoeethanol aangebracht om disulfidebindingen te verwijderen om eiwit lineair te maken. Elektroforese wordt vervolgens geïnitieerd. De resultaten zouden twee residuen van moleculen opleveren, waarvan één SDS-PAGE is.

De afwezigheid van SDS-PAGE is geen probleem omdat gelelektroforese nog steeds alleen kan worden uitgevoerd dat eiwitten niet al hun secundaire en tertiaire structuur verliezen en zich niet openen in over het algemeen rechte staven.

Ondertussen maakt natieve gelelektroforese gebruik van gel als een anticonvectief medium. Het wordt meestal gebruikt voor de scheiding van biologische macromoleculen zoals DNA, ribonucleïnezuur (RNA) en eiwit. Het kan ook worden gebruikt voor de scheiding van nanodeeltjes.

Er zijn twee hoofdgels gebruikt in natieve gelelektroforese, namelijk:

Agarosegel die wordt gebruikt voor grotere moleculen. Deze gel identificeert geen kleine verschillen tussen twee moleculaire banden. Het wordt ook uitsluitend gebruikt voor de scheiding van DNA. Visualisatie van agarosegel wordt uitgevoerd met de mix van ethidiumbromide.

Polyacrylamidegel die wordt gebruikt voor kleinere moleculen. Deze gel identificeert de verschillen tussen moleculaire banden. Afgezien van DNA kan het ook eiwitten scheiden.

Samenvatting:

1. SDS-PAGE is een niet-selectieve methode van gelelektroforese die wordt gebruikt op gebieden zoals: biochemie, forensische wetenschap, biologie en genetica om eiwitten los te maken van hun elektroforetische mobiliteit, terwijl gelelektroforese meestal wordt gebruikt voor de scheiding van biologische macromoleculen zoals DNA, ribonucleïnezuur (RNA) en eiwit. Het kan ook worden gebruikt voor de scheiding van nanodeeltjes.

2. Natieve gelelektroforese heeft twee typen, namelijk: agarosegel en polyacrylamidegel.