Verschil tussen HPLC en LCMS | HPLC vs LCMS

Anonim

Belangrijkste verschillen - HPLC vs LCMS

Laten we eerst kijken naar de betekenis van HPLC en LCMS voordat u het verschil tussen HPLC en LCMS analyseert. Chromatografie is een scheidingstechniek in chemische analyse waarbij monsterbestanddelen gescheiden worden tijdens de doorgang door middel van een chromatografisch medium. Het betreft ook interactie met de steekproef, stationaire fase en mobiele fase. HPLC staat voor High Performance Liquid Chromatography, en wordt gebruikt als een vloeistofchromatografiewerkwijze in analytische chemie. De combinatie van Liquid Chromatography en Mass Spectroscopy (LCMS) is ontwikkeld voor de kwantitatieve analyse van geselecteerde biomoleculen en het is een zeer gevoelige, nauwkeurige en specifieke analyseprocedure in vergelijking met HPLC . Dit is het sleutelverschil tussen HPLC en LCMC . Dit artikel zal u voorstellen voor HPLC en LCMC die betrekking hebben op chemische analyse en de verschillen tussen HPLC en LCMS bespreken.

Wat is HPLC?

High-performance vloeistofchromatografie (HPLC) is een populaire scheidingstechniek in analytische chemie . Het is voornamelijk gebruikt om de componenten te scheiden, om elke component in een mengsel te identificeren en te kwantificeren. Eerder was deze methode bekend als hogedrukvloeistofchromatografie omdat het afhankelijk was van pompen om een ​​onder druk vloeibaar oplosmiddel te vloeien dat het monstermengsel omvatte door een kolom die met een vast adsorptiemateriaal was verpakt. Elk bestanddeel in het monstermengsel interagereert verschillend met het vaste adsorptiemateriaal, wat resulteert in verschillende stromingssnelheden voor verschillende bestanddelen. Dit kan leiden tot de scheiding van de bestanddelen als ze de HPLC kolom uitstromen.

HPLC is gebruikt voor diverse applicaties zoals analyse van vitamine D niveaus in bloed , illegaal drugsgebruik van atleten door de bestanddelen van een complex biologisch monster uitzoeken voor onderzoeksdoeleinden en analyse en productie van farmaceutische producten .

Wat is LCMS?

Vloeistofchromatografie-massaspectrometrie (LCMS) is een analytische techniek die de fysieke scheidingsvermogen van vloeistofchromatografie combineert met de massa-analyse-eigenschappen van massaspectrometrie (MS). Vloeistofchromatografie is een scheidings techniek, en massaspectrometrie wordt gebruikt om de massa-op-ladingsverhouding van geladen deeltjes te analyseren. De fysieke scheiding wordt gewoonlijk bereikt door HPLC en alternatief, LCMS ook bekend als HPLC-MS .LCMS is een dominante analytische techniek die een zeer hoge nauwkeurigheid, gevoeligheid en specificiteit vergeleken met HPLC heeft. Zo is het nuttig bij veel toepassingen zoals onderzoeksdoeleinden, geneesmiddelanalyse, voedselanalyse, enz. LCMS is voornamelijk gebruikt voor het scheiden, detecteren, identificeren en kwantificeren van biochemische eigenschappen van een bepaald monster in aanwezigheid van complexe chemische mengsels.

Wat is het verschil tussen HPLC en LCMC ?

Acroniem en definitie van HPLC en LCMC

HPLC: HPLC staat voor High Performance Liquid Chromatography. Het is een scheidingstechniek die voornamelijk wordt gebruikt om de componenten te scheiden, om elke component in een mengsel te identificeren en te kwantificeren.

LCMS: LCMS staat voor Liquid Chromatography en Mass Spectrometry. Het is een analytische techniek die de fysieke scheidingsvermogen van vloeistofchromatografie combineert met de massaanalyse-eigenschappen van massaspectrometrie (MS).

Kenmerken van HPLC en LCMC

Classificatie

HPLC: Dit is een methode voor vloeibare chromatografie.

LCMS: Dit is een combinatie van vloeibare chromatografie methode en massaspectrometrie methode.

Efficiëntie

HPLC: In vergelijking met LCMS is de HPLC-analyse minder efficiënt en langzamer.

LCMS: In vergelijking met HPLC is de LCMS-analyse efficiënt en sneller.

Gevoeligheid

HPLC: In vergelijking met LCMS is de HPLC-analyse minder gevoelig.

LCMS: In vergelijking met HPLC is de LCMS-analyse gevoeliger.

Specificiteit

HPLC: In vergelijking met LCMS is de HPLC-analyse minder specifiek.

LCMS: In vergelijking met HPLC is de LCMS-analyse meer specifiek .

Nauwkeurigheid

HPLC: HPLC geeft minder nauwkeurige resultaten dan LCMS voor het bepalen van sommige chemicaliën.

LCMS: LCMS geeft nauwkeuriger resultaten dan HPLC voor het bepalen van sommige chemicaliën.

Component

HPLC: HPLC kan worden beschouwd als een component van LCMS.

LCMS: LCMS kan niet beschouwd worden als een component van HPLC.

Ionbron

HPLC: Ionbron bestaat niet in HPLC-instrument.

LCMS: Ion bron is aanwezig in LCMS instrument.

Toepassingen

HPLC: Ionen, polymeren, organische moleculen en biomoleculen kunnen met behulp van HPLC worden geanalyseerd.

LCMS: Organische moleculen en biomoleculen kunnen worden geanalyseerd. In tegenstelling tot HPLC kan LCMS worden gebruikt om onvolledig opgeloste mengsels te onderzoeken.

Operation

HPLC: Het diagram van een HPLC-instrument is weergegeven in figuur 1 en bevat gewoonlijk een autosampler, pompen en een detector. De monsterneming introduceert het monstermengsel in de mobiele fase (drukmengsel van oplosmiddelen zoals water, acetonitril en / of methanol) die het overbrengt naar de kolom. De pompen leveren de gewenste stroom en samenstelling van de mobiele fase door de kolom. De kolom wordt gevuld met het adsorptiemiddel, dat een korrelig vast deeltje is, zoals silica of polymeren. De detector produceert een signaal dat evenredig is aan de hoeveelheid aanwezigheid van monsterbestanddelen in de kolom, waardoor het mogelijk is om te analyseren van de geselecteerde monsterbestanddelen.Het HPLC instrument wordt gecontroleerd, en data analyse wordt geleverd door een digitale microprocessor en gebruikerssoftware.

Figuur 1: Diagram van het HPLC-instrument

LCMS: Het diagram van het LCMS-instrument staat in figuur 2. Het monster-extract wordt in de kolom bestaande uit HPLC ingevoegd. Deze kolom behoudt monster metabolieten op basis van fysieke karakters, en verschillende metabolieten vloeien naar de massaspectrometer bij verschillende tijdsintervallen. Massaspectroscopie wordt gebruikt voor het beoordelen van massa's deeltjes, voor het bepalen van de elementaire rangschikking van een molecuul en voor het verduidelijken van de molecuulstructuren. Het monster moet echter geïoniseerd worden om geladen moleculen te genereren om hun massa-op-lading verhoudingen te bepalen. Daarom, in plaats van HPLC-instrumenten, bestaat LCMS uit drie extra modules, zoals ijzergebruik, een massaanalysator en een detector. Een ionenbron kan gasfasemonster in ionen omzetten en een massaanalysator die de ionen door hun massa's groepeert met behulp van elektromagnetische velden. Tenslotte, een detector kwantificeert de waarden en levert data van elk aanwezige ion in het monster. De LCMS techniek kan zowel voor kwalitatieve als kwantitatieve toepassingen worden gebruikt.

Figuur 2: Diagram van LCMS-instrument

Concluderend is HPLC een vloeistofchromatografiewerkwijze, terwijl LCMS een combinatie is van vloeistofchromatografie en massaspectrometrie. Beide deze analysetechnieken hebben verschillende kenmerken, maar ze kunnen gebruikt worden om voedselsamenstellingen, farmaceutica en andere bioactieve moleculen te identificeren en te kwantificeren.

Referenties Arpino, P. (1992). Gecombineerde vloeistofchromatografie massaspectrometrie. Deel III. Toepassingen van thermospray. Massa Spectrometrie Beoordeling, 11 : 3. Gerber, F., Krummen, M., Potgeter, H., Roth, A., Siffrin, C. en Spoendlin, C. 2004). Praktische aspecten van snelle reversed-fase high-performance vloeistofchromatografie met behulp van 3μm deeltjesverpakkende kolommen en monolithische kolommen in farmaceutische ontwikkeling en productie die werkt onder de huidige goede productiepraktijk. Journal of Chromatography, 1036 (2): 127-133. Lee, M. S. en Kerns, E.H. (1999). LC / MS applicaties in drug ontwikkeling. Massaspectrometrie Reviews, 18 (3-4): 187-279. Murray, K. K. (1997). Koppeling van matrix-geassisteerde laser desorptie / ionisatie aan vloeibare scheidingen. Massa Spectrometrie Beoordeling 16 (5): 283. Image Courtesy: "Hplc" door Original uploader was Kjaergaard at en. wikipedia - Overgebracht van en. wikipedia. (Publiek domein) via Commons