Verschil tussen Gram Stain and Acid Fast | Gram Stain vs Acid Fast

Belangrijkste verschil - Gram Stain vs Acid Fast

Bacteriën zijn zeer kleine micro-organismen. Ze zijn transparant en hun detectie is moeilijk onder levende en onbeschadigde omstandigheden. Aldus worden verschillende kleursystemen ontwikkeld om bacteriële detectie te vergemakkelijken. Er zijn drie belangrijke soorten kleuringstechnieken: eenvoudige kleuring, differentiële kleuring en structurele kleuring. Differentiële kleuring is een techniek die meer dan één vlek gebruikt om bacteriën te differentiëren. Gramvlek en zure snelle vlek worden meestal bekend als differentiële vlekken. Gramkleuring is een differentiële kleuringstechniek, die bacteriën scheidt in twee groepen, bekend als Gram-positieve bacteriën en Gram-negatieve bacteriën. De zuur-snelle vlek is een differentiële vlek gebruikt om zuur-snelle organismen zoals Mycobacterium uit niet-zure snelle organismen te identificeren. Dit is het belangrijkste verschil tussen Gram stain en Acid Fast stain.

INHOUD

1. Overzicht en sleutelverschil

2. Wat is Gram Stain

3. Wat is zuur snel

4. Vergelijkingen tussen Gram Stain and Acid Fast

5. Side by Side Vergelijking - Gram Stain vs Acid Fast In Tabular Form

6. Samenvatting

Wat is Gram Stain?

Gramvlek is een belangrijke differentiële kleuringstechniek die wordt gebruikt voor bacteriële identificatie in microbiologie. Deze techniek werd in 1884 door de Deense bacterioloog Hans Christian Gram geïntroduceerd. Gramkleuring categoriseert bacteriën in twee hoofdgroepen genaamd gram positief en gram-negatief, die erg belangrijk zijn bij de bacteriële classificatie en identificatie. Microbiologen verrichten gramfartering als een eerste stap in bacteriële karakterisering tijdens hun studies.

Bacteriën worden gegroepeerd op basis van de verschillen in hun celwand. Gram positieve bacteriën bestaan uit een dikke peptidoglycanlaag in hun celwand, terwijl gram-negatieve bacteriën bestaan uit een dunne peptidoglycanlaag in hun celwand. De uitkomst van het gramverf zal gebaseerd zijn op het verschil in de dikte van de peptidoglycanlaag van de celwand.

Gramkleuring wordt uitgevoerd met behulp van vier verschillende reagentia, namelijk; primaire vlek, mordant, decoloriserende middel en tegenvlek. Kristalviolet en safranine worden respectievelijk gebruikt als respectievelijk primaire en tegenvlekken, terwijl gram jodium en 95% alcohol als respectievelijk mordant en decolourizer worden gebruikt.De basis stappen van gramvlek zijn als volgt;

Er wordt een bacteriële smeer op een schone glazen glijbaan vervaardigd, warmte gefixeerd en gekoeld.
Smeer wordt over 1 à 2 minuten met kristalviolet overspoeld.
Smeer wordt afgespoeld met langzaam stromend kraanwater om overtollige vlekken te verwijderen.
Grams jodium wordt 1 minuut aan de smeer aangebracht.
Smering wordt gespoeld met langzaam stromend kraanwater.
Smeermiddel wordt gedurende 2 - 5 seconden gewassen met 95% alcohol en gespoeld met langzaam stromend kraanwater.
Smeer wordt tegen 1 minuut gevuld met safranine.
Smeer wordt gespoeld met langzaam stromend kraanwater, gedroogd en waargenomen onder de microscoop.

Aan het eind van de gramvlek worden gramnegatieve bacteriën waargenomen in roze kleur, terwijl gram positieve bacteriën in paars kleur worden waargenomen.

Figuur 01: Gram-negatieve en Gram-positieve bacteriën

Het resultaat van de gramvlek wordt bepaald door de dikte van de peptidoglycanlaag in hun celwand. Tijdens de decoloriserende stap worden de primaire vlek en de mordant gemakkelijk verwijderd van de gramnegatieve bacteriën en worden ze kleurloos omdat ze een dunne peptidoglycanlaag hebben. De primaire vlek wordt bewaard in de gram positieve bacteriën aangezien zij een dikke peptidoglycanlaag hebben. De tellervlek zal niet effectief zijn voor gram positieve bacteriën door de retentie van de primaire vlek. Dus, positieve bacteriën zullen zichtbaar zijn in primaire vlekkenkleur, dat wil zeggen een paarse kleur. De tegenvlek zal de gramnegatieve bacteriën vlek en ze zullen zichtbaar zijn in de kleur van de keuze, die de safranine kleur is. Daarom is het gemakkelijk om bacteriën in twee groepen door gramvlek te categoriseren en het is waardevol bij bacteriële differentiatie en identificatie.

Wat is zuur snel?

Zuurbestendigheid is een fysieke eigenschap van bepaalde bacteriën, in het bijzonder hun weerstand tegen afbinding door zuren tijdens de kleurprocedures. Eenmaal gekleurd, resistent deze organismen verdunde zuur- en of ethanol-gebaseerde ontkleuringsprocedures die vaak voorkomen in veel kleurenprotocollen. Zo wordt de naam 'zuur snel' gegeven aan die organismen. Deze eigenschap wordt getoond door een hoog niveau van wasachtig materiaal (mycolinezuren) in hun celwanden. Deze test is cruciaal voor de identificatie van Mycobacterium tuberculosis.

Figuur 2: Zure Snelle Mycobacteriën

Deze zure snelle vlek werd in 1882 door Paul Ehrlich ontwikkeld. Ehrlich's zure snelle techniek werd gewijzigd door Ziehl-Neelsen en wordt nu vaker gebruikt. Zure snelle vlekprocedure omvat drie verschillende reagentia. Carbol fuschin wordt gebruikt als de primaire vlek. Zure alcohol wordt gebruikt als het decolouriserende middel. Methylenblauw wordt gebruikt als contravlek. De kleurprocedure wordt als volgt uitgevoerd.

De primaire vlek (carbol fuchsin) wordt aangebracht op het vaste monster op de dia (alle cellen zullen in rode kleur zijn gekleurd).
De glijbaan wordt 5 minuten verwarmd, waardoor de vlekken goed in de cellen worden geleid.
Dan wordt de ontkleurende oplossing toegevoegd (dit verwijdert de rode kleurstof uit alle cellen behalve de zure snelle bacteriën).
Methylenblauw wordt toegevoegd als een tegenvlek (het kleurt alle ontkleefde bacteriële cellen).
Zure snelle bacteriën blijven rood terwijl nonacide snelle bacteriën in blauw vlek.

Wat zijn de overeenkomsten tussen Gram Stain and Acid Fast?

Gramvlek en zuur snel zijn twee differentiële kleuringstechnieken.
Beide technieken categoriseren bacteriën in twee groepen.
Beide technieken gebruiken twee vlekken en één ontkleurend.

Wat is het verschil tussen Gram Stain and Acid Fast?

- diff. Artikel Midden voor tafel ->

Gramvlek tegen zuur Snel
Gramvlekken is een differentiële kleuringstechniek, die bacteriën scheidt in twee groepen Gram-positieve bacteriën en Gram-negatieve bacteriën.	Zure Snelle vlek is een differentiële vlek gebruikt om zuur-snelle organismen te identificeren uit niet-zure snelle organismen.
Primaire Vlek
Kristalviolet is de veelgebruikte primaire vlek in gramkleuring.	Carbol fuchsin is de primaire vlek gebruikt in zuur snel.
Decolourizing Agent
95% alcohol wordt gebruikt als decolouriserend middel in gramvlek.	Zure alcohol wordt als zoutverwarend middel gebruikt.
Counter Stain
Gramvlek gebruikt safranine als de tegenvlek.	Zure snelle vlek gebruikt methyleenblauw als de tegenvlek.
Observatie
Gram-negatieve bacteriën worden waargenomen in de kleur van de keuze, en positieve bacteriën worden in paars kleur waargenomen.	Zure Snelle bacteriën worden waargenomen in rode kleur en niet-zure snelle bacteriën worden in blauwe kleur waargenomen.

Samenvatting - Gram Stain vs Acid Fast

Visualisatie van micro-organismen in de levende staat is moeilijk. Daarom worden biologische vlekken en vlekkenprocedures uitgebreid gebruikt om hun eigenschappen te bestuderen. Differentiële kleuring is een soort kleuringstechniek die wordt gebruikt om bacteriën te differentiëren. Gramvlek en zure snelle vlek zijn twee differentiële kleuringstechnieken. Gramkleuring onderscheidt gramnegatieve bacteriën en gram positieve bacteriën op basis van de dikte van hun celwanden. Zure snelle kleuring onderscheidt zuur snelle bacteriën van niet-zure snelle bacteriën op basis van het gehalte aan mycolzuurzuur in de celwand. Dit is het verschil tussen zuur snel en gram vlekken.

Download PDF Versie Gram Stain vs Acid Fast

U kunt de PDF-versie van dit artikel downloaden en deze gebruiken voor offline doeleinden zoals per citaatbrief. Gelieve PDF-versie hier downloaden Verschil tussen Gram Stain and Acid Fast.

Referenties:

1. Aryal, Sagar. "Acid-Fast Stain-Principle, Procedure, Interpretatie en Voorbeelden. "Online Microbiology Notes. N. p., 08 mei 2017. Web. Beschikbaar Hier. 20 juli 2017.

2. Differentiële vlekken voor het identificeren van bacteriën: Gram, Zure-Snelle & Endospore. N. p., n. d. Web. Beschikbaar Hier. 20 juli 2017.

Image Courtesy:

1. "Lymfeknoop - Atypische mycobacteriële infectie (MAI) - AFB vlek" van Yala Rosen (CC BY-SA 2.0) via Flickr

2. "Gram stain 01" Door Y tambe - Y tambe's bestand (CC BY-SA 3. 0) via Commons Wikimedia